Thuốc Atra 10 liệu pháp trúng đích trong điều trị bạch cầu cấp tích
Điều trị bệnh bạch cầu cấp tính (APL) bằng axit retinoic all-trans (Thuốc ATRA) là một thuốccủa liệu pháp nhắm trúng đích, nhưng xác định các mục tiêu quan trọng ở hạ lưu của ATRA đã được chứng minh là khó nắm bắt. Trong số này về Blood , Hattori và các đồng nghiệp đã sử dụng một xét nghiệm chức năng để xác định các mục tiêu đó. Họ đã xác định được một gen mà ATRA cảm ứng là cần thiết, mặc dù không đủ, để gây ra sự bắt giữ chu kỳ tế bào và cho phép sự trưởng thành của các tế bào NB4 được xử lý ATRA.
RARα hoạt động như một dị vòng với các thụ thể X retinoid (RXR). Trong trường hợp không có phối tử, RAR / RXR tuyển dụng một tổ hợp ức chế để thúc đẩy các gen mục tiêu; khi liên kết ATRA, chất ức chế tách ra, cho phép liên kết các chất kích hoạt phiên mã, gây ra sự acetyl hóa histone và tăng phiên mã. Protein hợp nhất PML-RAR, được hình thành bởi t liên kết APL (15; 17), hiển thị giảm liên kết ATRA, dẫn đến sự liên kết phức tạp của lõi với sự hiện diện của mức độ ATRA sinh lý; sự ức chế này có thể được đảo ngược bằng phương pháp điều trị ATRA dược lý. 1
Một vài mục tiêu ATRA đã được xác định, bao gồm phân tích c-myc , C / EBPϵ và p21 , 2 và microarray cho thấy hơn 150 gen được điều biến để đáp ứng với điều trị ATRA của các tế bào NB4 có nguồn gốc từ một bệnh nhân mắc APL. 3Tuy nhiên, như với tất cả các nghiên cứu microarray, thách thức là tìm ra các gen quan trọng xứng đáng được nghiên cứu thêm. Chiến lược tao nhã được sử dụng bởi Hattori và các đồng nghiệp đã sử dụng chức năng đọc để xác định các gen cần thiết cho phản ứng ATRA. Cảm ứng ATRA dẫn đến ức chế tăng trưởng. Khai thác quan sát đó, các tác giả đã sử dụng RNAi để nhắm mục tiêu phản ứng ATRA: Các tế bào NB4 được tải nạp với thư viện shRNA retrovirus và các dòng vô tính được sàng lọc để kháng ATRA như được chứng minh bằng sự tăng trưởng bền vững trong môi trường chứa ATRA. Do đó, các tác giả đã xác định được 26 protein cần thiết cho việc bắt giữ chu kỳ tế bào do ATRA gây ra.
Các nhà điều tra tập trung vào UBE2D3, một loại enzyme liên hợp ubiquitin. Dữ liệu của họ cho thấy rằng việc điều chỉnh xuống của UBE2D3 ngăn chặn chu kỳ tế bào bằng cách ngăn chặn sự xuống cấp của cyclin D1. Sự phổ biến của protein mục tiêu đòi hỏi 3 enzyme hợp tác: enzyme kích hoạt E1, enzyme liên hợp E2 và ligase E3. Tính đặc hiệu của chất nền được trao cho các dây chằng E3 và các protein mục tiêu được xác định rõ ràng bằng cách hợp tác các enzyme E 2 và E3. Polyubiquitination sau đó phá hủy protein cho sự thoái hóa proteasomal (xem hình ). 4 Các nghiên cứu trước đây đã nhấn mạnh UBE1L, một loại enzyme E1, là một gen đáp ứng ATRA trong NB4 5; những phát hiện mới của Hattori và các đồng nghiệp hỗ trợ thêm cho vai trò quan trọng đối với sự xuống cấp của proteasom trong sự trưởng thành do ATRA gây ra. Các nghiên cứu hiện tại chứng minh rằng tác động của shRNA UBE2D3 được mô phỏng theo sự biểu hiện quá mức của cyclin D1 và bị bãi bỏ bởi cyclin D1, điều chỉnh lại, xác nhận rằng cyclin D1 là mục tiêu quan trọng của UBE2D3.
Vẫn còn nhiều điều cần xác định liên quan đến sự trưởng thành của các tế bào APL để đáp ứng với ATRA. Các thí nghiệm tiếp theo là cần thiết để xác nhận xem UBE2D3 là mục tiêu sao chép trực tiếp hay gián tiếp của ATRA, mà ligase E3 xác định nhắm mục tiêu cyclin D1 và cách điều chỉnh và vai trò của các protein khác trong phản ứng ATRA. Tuy nhiên, màn hình chức năng là một bổ sung hấp dẫn cho bộ công cụ để giải quyết những câu hỏi này và có thể cung cấp thông tin trị liệu quan trọng trên đường đi. Ví dụ, như các tác giả đã chỉ ra, tầm quan trọng của sự suy giảm proteasom của protein chu trình tế bào đối với phản ứng ATRA cho thấy rằng các chất ức chế proteasome, đang được sử dụng để điều trị số lượng ác tính ngày càng tăng, ít nhất có thể bị chống chỉ định trong APL, ít nhất là trong kết hợp với ATRA.